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庆元香菇种植标准三

4菌种质量检验方法

  4.1检验是香菇菌种的方法

  4.1.1标签检验

  核对菌种名称、菌种编号、确认是香菇菌种和是已审定的菌株。

  4.1.2外现目测菌丝检验

  按本标准中3。7菌丝外观形态指标检验。

  4.2检验香菇菌种是活体的方法

  4.2.1生长现象检验

  在无菌的条件下把菌丝移植于PDA或木屑培养基上,置于23℃~25℃温度下培养,有生长现象。

  4.2.2呼吸现象检验

  将菌丝置于20℃以下的温度培养,在菌丝上方的试管壁或玻璃瓶壁有水雾或水珠出现。

  4.3菌种纯度检验的方法

  4.3.1目测检验

  按本标准中3.6菌种纯度和3.7菌丝外现形态指标的标准检验。

  4.3.2培养检验

  按本标准中4.2.1生长现象检验的方法检验,无发现杂菌。

  4.4活力检验的方法

  4.4.1菌丝恢复生长检验

  从4℃移至23℃~25℃条件下培养,48h内恢复菌丝生长;在PDA培养基上置于23℃~25℃条件下培养,菌落直径24h伸长0。5℃m以上。

  4.4.2显微检验

  在显微镜下观察,锁状联合频率高。

  4.4.3呼吸量检验

  用华勃氏呼吸仪或氧电极测试法,测定一定容量内单位重菌丝生长空间氧分压降低程度和℃O2排出量,耗氧量大、排出℃O2量多的菌种活力强,相反活力弱。

  4.4.4酶活性检测

  酯质同功酶、多酚氧化酶、纤维素酶、虫漆酶等可作为检验菌种活力强弱的指标之一。多酚氧化酶含量高的菌种是菌丝菌龄短、活力强的菌种;纤维素酶和虫漆酶含量高的菌种是活力强、生物转化率高的丰产菌种。

  4.5菌种同拮抗检验

  4.5.1菌丝拮抗检验

  把不同来源的香菇菌丝接种在同一培养上,有对峙反应的菌种是具有不同遗传基因的菌种,没有对峙反应的是具有相同基因的菌种。

  4.5.2同功酶测定

  通过菌丝蛋白粹取后对蛋白质中电泳层析酶谱的显色,测出谱带相似程度,以此检验菌种间的异同和遗传特性和相似程度。这是菌种异同程度和是否新菌株的鉴别方法之一。

  4.6菌种种质特性分子标志检测

  以各菌株细胞中染色体中遗传表达结构中的大小分子或分子基因为标志,检测菌种优良程度,并限得该菌株标志。常用的方法除同功酶谱测定外,还有电泳染色体组型脱氧核糖核酸(DNA)鉴定分析法、限制性片断长度多态性(RFLP)分析法等

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